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離心濃縮儀在DNA/RNA濃縮中的應用

 更新時間:2025-06-06 點擊量:340

離心濃縮儀在DNA/RNA濃縮中展現出顯著的技術優勢,成為分子生物學研究的關鍵工具。該設備通過真空負壓(50-100 mbar)降低溶劑沸點,配合溫和加熱(30-40℃)和離心力(1000-1500 rpm)三重作用,可在30-60分鐘內高效濃縮微量核酸樣品(50μL→5μL),同時保持DNA/RNA完整性(回收率≥95%)。其封閉式設計有效防止氣溶膠污染,支持96孔板高通量操作,顯著優于傳統乙醇沉淀法(節省60%時間且避免鹽分殘留)。典型應用于NGS文庫構建、PCR產物純化等場景,尤其適合珍貴樣本處理,如單細胞轉錄組測序中的cDNA濃縮。部分機型還集成冷凝捕集功能,實現有機溶劑安全回收,滿足GLP實驗室規范要求。

離心濃縮儀在DNA/RNA濃縮中的應用

離心濃縮儀憑借其溫和高效的特性,已成為分子生物學實驗中核酸(DNA/RNA)濃縮純化的關鍵設備,其應用優勢及技術要點如下:

1、活性保護

• 低溫(30-40℃)真空濃縮,避免核酸高溫變性(如DNA斷裂或RNA降解);

• 對比傳統乙醇沉淀法,回收率提升20%以上(文獻數據);

2、高通量處理

• 單次可并行處理48-180個微量樣本(適配1.5mL離心管);

• 自動化程序實現無人值守,節省60%操作時間;

3、兼容性廣

• 適用于各類提取緩沖液(TE buffer、Tris-HCl等)及有機溶劑(異丙醇、乙醇);

• 可濃縮pg級至μg級核酸,滿足NGS、PCR等下游實驗需求;

離心濃縮儀在DNA/RNA濃縮中的應用

以DNA濃縮為例,離心濃縮儀操作主要步驟如下:

一、實驗前準備

1、設備與耗材

○離心濃縮儀(預冷至4℃)

○1.5/2.0 mL耐有機溶劑離心管(推薦RNase/DNase-free)

○真空泵油(確保液位達標)

○冷阱

2、樣品預處理

○檢測DNA初始濃度(Nanodrop A260/A280應為1.8-2.0)

○若含高鹽(如NaCl>200 mM),用TE buffer稀釋10倍

二、分裝與裝載

1、分裝樣品

將DNA溶液(≤1.5 mL/管)對稱裝入離心轉子,平衡誤1差<0.1 g。

2、參數設置

離心濃縮儀在DNA/RNA濃縮中的應用

三、濃縮過程監控

1、實時觀察

通過觀察窗確認無液體飛濺(若發生,立即暫停并檢查平衡),冷凝管結霜量>50%需暫停除霜。

2、終點判斷

自動模式:儀器檢測到真空度穩定(ΔP<5 mbar/5min)

手動模式:目測管底出現1-2 μL液滴

四、終止與回收

1、停機步驟

先關閉加熱模塊,再緩慢泄真空(速率≤10 mbar/s),最后停止離心。

2、樣品處理

立即用20 μL TE buffer重懸DNA(輕柔吹吸10次),短暫離心(1000g×30s)收集管壁殘留。

五、質量控制

1、濃度檢測

Qubit定量(比Nanodrop更準確)

瓊脂糖凝膠電泳(驗證無降解)

2、設備維護

用10%乙醇擦拭轉子及腔體

真空泵油變色(>200小時)需更換


離心濃縮儀在DNA/RNA濃縮中的應用

富睿捷真空離心濃縮設備可同時處理多個樣品,無需擔心交叉污染。系統內程序可設定至多30個,主機配備樣品在線成像系統,可在運行過程中觀察樣品濃縮狀態,并根據不同的樣品對整機的真空度進行調節。設備采用皮拉尼真空計可實時顯示腔體內的真空度,并保證真空度的真實性。根據不同的樣品可對整機轉速進行調節。


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